ASFV在体外可以在哪些原代和传代细胞中增殖
ASFV在体外可以在原代细胞:猪外周血单核细胞、肺泡巨噬细胞等,以及传代细胞系:Vero,COS-1,IPAM和WSL等中增殖。其中,ASFV在肺泡巨噬细胞中的增殖最优(Carrascosa et al 2011)。
ASFV进入细胞的主要方式
因为ASFV粒子直接非常大,为200-300nm,ASFV主要通过胞饮和胞吞两种方式进入宿主细胞(图1)。胞吞方式最少可以细分为三种:受体介导的胞吞作用,经典的网格蛋白介导的胞吞作用以及肌动蛋白驱动膜皱褶胞吞作用。其中,经典的网格蛋白介导的胞吞作用是主要的胞吞方式(Andrés 2017)。
图1 ASFV进入细胞和脱壳的工作模式(Andrés 2017)
非洲猪瘟病毒进入细胞的方式对我们的启示
1、因为ASFV病毒粒子较大,进入细胞困难,因此更容易进入具有吞噬作用的巨噬细胞,造成了ASFV,特别是潜在疫苗毒株的大规模培养较为困难;
2、ASFV到底是否会引起宿主的中和性抗体是有争议的(Escribano et al 2013),部分的原因可能是ASFV可以不通过受体介导的胞吞作用进入机体,因此可能没有明显的抗原抗体反应,导致得到相互冲突的结果;
3、为什么ASF的灭活疫苗基本无用,因为灭活疫苗只能部分阻碍ASFV进入细胞,但对其主要的经典的网格蛋白介导的胞吞作用可能影响并不大;
4、组织结构不完整可能会促进ASFV进入机体,对粘膜友好的微生态制剂可能通过减少ASFV进入宿主而帮助防控ASF;
5、ASFV通过口鼻的直接接触传播,可能与口腔粘膜和鼻腔黏膜中的具有吞噬作用的细胞相关;
6、蛋白pE248R对ASFV脱壳和重组装非常重要,提示我们可能存在关键环节的拮抗物质,能帮助ASF的防控。
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